Анализ данных ЭЛИСА. Стандартная кривая в GraphPad Prism.

Содержание:

1. Введение
2. Шаг 1: Подготовка образцов
3. Шаг 2: Анализ данных
4. Шаг 3: Построение стандартной кривой
5. Шаг 4: Расчет концентрации неизвестных протеинов
6. Шаг 5: Создание графика результатов
7. Шаг 6: Определение статистической значимости
8. Заключение

Введение {#introduction}

В данном видеоклипе я расскажу вам, как анализировать данные, полученные с помощью ЭЛИСА-теста, и как строить линейную стандартную кривую с помощью программы GraphPad Prism. Я также покажу вам, как рассчитать концентрацию неизвестных протеинов и построить график результатов эксперимента. Вы узнаете, как определить значимые различия между группами с использованием статистического анализа. Для этого мы будем использовать данные, взятые с помощью ЭЛИСА-прибора и записанные в таблицу Excel.

Шаг 1: Подготовка образцов {#step-1}

Перед началом анализа данных необходимо подготовить образцы для эксперимента. В таблице Excel представлен дизайн пластины для 96-капельного СТЭЛИС-эксперимента. Первые два столбца содержат образцы стандартной кривой, которые были разведены последовательно. Оставшиеся столбцы содержат неизвестные образцы (контрольные и образцы болезни), которые также были разведены последовательно. Для каждого образца была измерена оптическая плотность при длине волны 450 нм.

Шаг 2: Анализ данных {#step-2}

Первым шагом в анализе данных является вычитание планки из оптической плотности каждого образца. Для этого в программе GraphPad Prism выберите соответствующую ячейку и вычислите разность между оптической плотностью и средним значением оптической плотности контрольной планки. После вычитания планки получите скорректированную оптическую плотность для каждого образца.

Шаг 3: Построение стандартной кривой {#step-3}

Для построения стандартной кривой в программе GraphPad Prism выберите опцию "Интерполяция стандартной кривой". Так как данные линейны, выберите опцию "Интерполирование по линейному уравнению". Построенная стандартная кривая позволит вычислить концентрацию протеинов для каждого неизвестного образца на основе этой кривой.

Шаг 4: Расчет концентрации неизвестных протеинов {#step-4}

После построения стандартной кривой программой GraphPad Prism будет рассчитана концентрация протеинов для каждого неизвестного образца. Интерполация X-среднего значения позволяет получить концентрацию и соответствующую оптическую плотность для каждого образца. Также вы можете увидеть значения для дубликатов и параметры линии наилучшего соответствия.

Шаг 5: Создание графика результатов {#step-5}

Для визуализации полученных результатов можно создать график или график-диаграмму в программе GraphPad Prism. Для этого необходимо скопировать данные о концентрации протеинов и оптической плотности для контрольной и болезненной групп и вставить их в новый лист программы. Затем выберите тип графика и внесите необходимые настройки для осей и заголовков графика.

Шаг 6: Определение статистической значимости {#step-6}

Для определения статистической значимости различий между контрольной и болезненной группами можно использовать функцию t-теста в программе GraphPad Prism. Выберите соответствующую опцию и укажите тип теста (двусторонний). Программа вычислит p-значение и покажет, является ли различие статистически значимым. Если p-значение меньше 0,05, различие считается значимым.

Заключение {#conclusion}

Анализ данных, полученных с помощью ЭЛИСА-теста, и построение стандартной кривой с помощью программы GraphPad Prism позволяют оценить концентрацию неизвестных протеинов и определить статистическую значимость различий между группами. Этот метод является полезным инструментом для исследования биомедицинских данных и может быть использован в различных исследовательских областях.

FAQ

Q: Какова цель ЭЛИСА-теста? A: Целью ЭЛИСА-теста является определение наличия и концентрации определенного белка или антигена.

Q: Как выбрать подходящую программу для анализа данных ЭЛИСА? A: GraphPad Prism является одним из наиболее распространенных программных инструментов для анализа данных ЭЛИСА.

Q: Что такое стандартная кривая и зачем она нужна? A: Стандартная кривая - это график зависимости оптической плотности от известных концентраций стандартных образцов. Она используется для определения концентраций неизвестных образцов на основе их оптической плотности.

Q: Как провести статистический анализ данных ЭЛИСА? A: Для статистического анализа данных ЭЛИСА можно использовать t-тест или непараметрический тест Вилкоксона в программе GraphPad Prism.

Q: Как интерпретировать результаты ЭЛИСА-теста? A: Результаты ЭЛИСА-теста интерпретируются с помощью анализа статистической значимости. Если p-значение меньше 0,05, различие считается статистически значимым.

Ресурсы

1. GraphPad Prism